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鸡新城疫病毒中和单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 李青梅 1 ; 王丽 1 ; 冯丽丽 2 ; 张雨杭 3 ; 赵东 1 ; 杨艳艳 1 ; 邢广旭 1 ; 柴书军 1 ; 李赛赛 1 ; 张丽萍 1 ; 郭军庆 1 ; 张改平 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

2.河南省农业科学院农业经济与信息研究所

3.河南农业大学牧医工程学院

关键词: 鸡新城疫病毒;单克隆抗体;免疫过氧化物酶单层细胞试验;血凝抑制试验;中和试验;中和活性

期刊名称: 河南农业科学

ISSN: 1004-3268

年卷期: 2017 年 46 卷 01 期

页码: 127-131

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用差速离心法纯化鸡新城疫病毒(NDV)标准毒株F48E8,免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤细胞技术制备抗NDV单克隆抗体,旨在为NDV中和抗原表位分析奠定基础。将NDV感染BHK-21细胞,建立异源免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)的单克隆抗体检测方法,筛选获得14株分泌抗NDV单克隆抗体杂交瘤细胞株,其单克隆抗体腹水IPMA效价均在0.50×10-2~2.56×10-5(F48E8株和La Sota株)。血凝抑制试验(HI)结果表明,单克隆抗体1G6、2C1、4D2、5F2和13A5具有血凝抑制活性,其HI效价在(6~12)log2(F48E8株)和(9~11)log2(La Sota株)。病毒中和试验结果表明,单克隆抗体5F2和13A5对F48E8株和La Sota株均有明显的病毒中和活性,中和效价分别为1∶400~1∶800和1∶25。夹心ELISA结果表明,单克隆抗体5F2识别NDV HN蛋白,13A5识别F蛋白。综上,成功制备了具有中和活性的NDV单克隆抗体(5F2和13A5)。

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