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猪伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

作者: 郑敏 1 ; 黄梅清 1 ; 毛凝 1 ; 陈少莺 1 ; 俞伏松 2 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

2.福建省农业科学院生物技术研究所

关键词: 猪伪狂犬病毒;猪圆环病毒TaqMan-MGB;双重荧光定量PCR

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2016 年 36 卷 03 期

页码: 378-383

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 参照GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因以及猪圆环病毒2型(PCV2)中ORF2特异性序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件,建立了同时检测PRV野毒株和猪圆环病毒(PCV2)的双重荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果表明,该方法检测PRV和PCV2灵敏度分别可达2.23×101、4.5×102拷贝/μL,均比常规PCR检测方法高100倍;同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、均为阴性,无交叉反应;对30份疑似病料进行检测并与普通PCR进行比较,结果显示,二者检测PRV的总符合率为96.67%,检测PCV2的总符合率为93.33%。本试验建立的TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法可同时对PRV野毒株和PCV2进行早期快速诊断,可应用于病原学监测,流行病学调查等。

  • 相关文献

[1]PEDV、TGEV双重TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立及病原学调查. 陈秋勇,陈渊泉,陈如敬,车勇良,吴学敏,刘玉涛,周伦江,王隆柏. 2022

[2]耐药基因mcr-1和blaNDM-1的双重荧光定量PCR检测方法的建立. 张克旭,滚双宝,车勇良,周伦江,林长光,郭长明. 2021

[3]CSFV,SIV,PCV2,PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及初步应用. 李兆龙,黄梅清,程晓霞,陈仕龙,郑敏,朱小丽,张世忠,王劭,林锋强,陈少莺,吴南洋. 2010

[4]猪伪狂犬病毒gB基因序列分析. 陈如敬,周伦江,吴学敏,黄晓凤,车勇良,严山,王晨燕,王隆柏,刘玉涛,魏宏. 2016

[5]猪伪狂犬病病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立. 陈如敬,吴学敏,陈秋勇,严山,车勇良,王晨燕,王隆柏,周伦江. 2016

[6]猪伪狂犬病毒 gB 基因序列分析. 陈如敬,周伦江,吴学敏,黄晓凤,车勇良,严山,王晨燕,王隆柏,刘玉涛,魏宏. 2016

[7]荧光定量PCR技术及在动物疫病检测中的应用. 王隆柏,周伦江,庄向生,魏宏,车勇良,陈如敬. 2010

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