文献类型： 中文期刊

作者： 孙智锋 ¹ ; 钱永清 ¹ ; 方锡玲 ¹ ; 闻人楚 ¹ ; 唐永兰 ¹ ; 许大新 ¹ ; 陈培龙 ¹ ;

作者机构： 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 猪流行性腹泻病毒,单克隆抗体,ELISA

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 1998 年 02 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），通过蔗糖密度梯度离心将其纯化，获得较为完整的病毒颗粒。病毒ＥＬＩＳＡ效价为１∶３×１０５，蛋白含量为３．９６ｇ／Ｌ。将提纯的ＰＥＤＶ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，融合率为９５．６％。用间接ＥＬＩＳＡ进行筛选，共检出３８个阳性孔，阳性率为２８．８％。对其中１５个阳性值较高的孔进行３次再克隆，阳性率达１００％，最后获得１５株稳定分泌特异性抗ＰＥＤＶ单抗（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。ＥＬＩＳＡ阻断试验与交叉试验证明，其分泌的抗体具有高度特异性。腹水和细胞培养上清的ＥＬＩＳＡ效价分别为１∶１０３～１∶１０６和１∶１２８～１∶５１２。经鉴定，１５株ＭｃＡｂ的分子类型均为ＩｇＧ，均无免疫沉淀特性。杂交瘤细胞的染色体数目为９０～１１０，平均９５。尤为重要的是，这些杂交瘤细胞所分泌的抗体，有的对ＰＥＤＶ具有中和作用，能够阻断病毒对猪只的侵害作用。