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橡胶树3个可溶性无机焦磷酸酶基因的原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 朱家红 1 ; 徐靖 2 ; 于晓惠 3 ; 畅文军 3 ; 张治礼 3 ;

作者机构： 1.农业部橡胶树生物学重点开放实验室

2.海南省农业科学院

3.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 橡胶树;焦磷酸酶;基因;原核表达;蛋白纯化

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2013 年 34 卷 01 期

页码： 46-50

收录情况： CSCD

摘要： 焦磷酸酶对橡胶的生物合成具有重要的调控作用。将已克隆的3个可溶性无机焦磷酸酶基因的编码区插入到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建3个焦磷酸酶基因表达载体(pGEX-HbSIP1、pGEX-HbSIP2和pGEX-HbSIP3),再将表达载体转入大肠杆菌表达菌株进行诱导表达。结果表明:pGEX-HbSIP1、pGEX-HbSIP2表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,pGEX-HbSIP3只在补充稀有密码子的大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,表达率分别为35.4%、43.7%和18.5%。对原核表达的蛋白质进行纯化,获得3种可溶性重组蛋白GST-HbSIP1、GST-HbSIP2和GST-HbSIP3,总回收率分别约为7%、8%、3%。该结果为进一步研究这3种焦磷酸酶蛋白的分子特性、抗体制备及功能研究奠定基础。

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