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基于Nimble Cloning的新型植物BiFC载体的构建和应用

文献类型: 中文期刊

作者: 曾妍静 1 ; 沈文涛 1 ; 庹德财 1 ; 黎小瑛 1 ; 言普 1 ; 高新征 1 ; 周鹏 1 ;

作者机构: 1.海南大学热带作物学院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南热带农业资源研究院;海南医学院基础医学与生命科学学院

关键词: 分子克隆;Nimble Cloning;双分子荧光互补(BiFC);蛋白互作

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2019 年 23 期

页码: 7757-7763

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: Nimble Cloning是一项新型的分子克隆技术,具有操作简单、使用灵活、克隆效率高、标准化克隆等优点,但Nimble Cloning需要使用配套的表达载体。本研究将pDOE系列的4个整合型BiFC载体上的SfiI位点去除,然后在这4个载体的多克隆位点处插入NC克隆框,构建了一套适用于Nimble Cloning的新型植物BiFC表达载体,命名为pNC-BiFC-VD系列载体。将pNC-BiFC-VD载体应用到植物蛋白互作研究中,分析了番木瓜eIFiso4E和病毒PRSV的vpg蛋白之间的互作,结果表明番木瓜eIFiso4E和PRSV-vpg在细胞核发生互作。该套新型植物BiFC表达载体有望在植物蛋白互作研究中得到广泛应用。

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