文献类型: 中文期刊
作者: 张冬杰 1 ; 马守正 1 ; 汪亮 1 ; 刘娣 1 ;
作者机构: 1.黑龙江省农业科学院畜牧研究所
关键词: 猪;长链非编码RNA2099;前脂肪细胞;RNA pull down;质谱分析
期刊名称: 黑龙江畜牧兽医
ISSN: 1004-7034
年卷期: 2025 年 003 期
页码: 43-46
收录情况: 北大核心
摘要: 为了鉴定新发现的一个长链非编码RNA2099(lncRNA2099)的互作蛋白,试验使用体外培养的猪前脂肪细胞,PCR扩增获得带T7启动子的lncRNA2099体外转录用模板,通过RNA pull down、蛋白质银染及质谱分析的方法对可能与lncRNA2099互作的蛋白进行了筛选与分析。结果表明:PCR扩增和体外转录成功获得了带有生物素标记的lncRNA2099和反义链探针,以反义链探针为阴性对照,lncRNA2099在体外培养的脂肪细胞中共下拉出132个互作蛋白,去掉与阴性对照相同的86个蛋白后,获得46个特异蛋白。根据得分排名,与lncRNA2099互作的蛋白分别是膜联蛋白A2(ANXA2)、肌球蛋白重链2(MYH2)、Y-box结合蛋白(YBX1)和α微管蛋白(α-Tubulin)。说明RNA pull down技术联合质谱分析技术,可鉴定出新发现的lncRNA的互作蛋白。
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