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草莓FabHLH3基因克隆表达分析与过量和干涉表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 张青 1 ; 苗立祥 2 ; 张豫超 2 ; 杨肖芳 2 ; 蒋桂华 2 ;

作者机构： 1.临安市农林技术推广中心

2.浙江省农业科学院

关键词： 草莓;FabHLH3;基因克隆;表达模式;过表达和干涉表达载体

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2017 年 29 卷 02 期

页码： 220-227

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以八倍体草莓品种越心(Fragaria×ananassa cv.Yuexin)为试材,利用RT-PCR技术从果实中克隆出FabHLH3基因全长编码序列,运用生物学软件对该序列进行相关生物信息学分析,同时采用实时荧光定量PCR方法对FabHLH3基因在不同组织、果实不同发育阶段及不同光质处理下的表达模式进行研究。测序和分析结果表明,FabHLH3基因的CDS全长2 094 bp,编码697个氨基酸残基,该蛋白质理论分子量约为77.43ku、等电点(p I)为6.05;经DNAMAN分析,核苷酸序列和氨基酸序列与二倍体森林草莓(F.vesca)Fvb HLH3基因的一致性分别为92.04%和90.87%。利用实时荧光定量PCR检测FabHLH3基因在叶、叶柄、花和果实中的表达情况,发现在叶中的表达量最高,随着果实发育,FabHLH3基因表达量逐渐增加,在半红期达到最高,红果期开始下降。此外,FabHLH3基因的表达还受到红光和蓝光的诱导。用无缝克隆技术构建了FabHLH3基因的过量表达载体p Green-FabHLH3和干涉表达载体p Green-FabHLH3i,为进一步验证FabHLH3基因的功能奠定了基础。

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