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中国对虾细胞色素P450基因CYP4原核表达条件优化

文献类型: 中文期刊

作者: 张喆 1 ; 李健 2 ; 王芸 3 ; 韩俊英 4 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

2.中国水产科学研究院南海水产研究所

3.上海海洋大学水产与生命学院

4.大连海洋大学生命科学与技术学院

关键词: 中国对虾(Fenneropenaeus chinensis);细胞色素P450;原核表达

期刊名称: 海洋科学

ISSN: 1000-3096

年卷期: 2011 年 35 卷 09 期

页码: 49-55

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据克隆得到的中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)CYP4基因开放阅读框设计引物,构建了中国对虾CYP4基因原核表达载体p28a-CYP4,并对重组菌株Rosetta/28a-CYP4的原核表达条件进行了优化。结果表明:p28a-CYP4转化Rosetta后可实现CYP4基因的原核表达,SDS-PAGE分析显示其在56.0 kDa处有显著诱导条带;通过对诱导温度、IPTG浓度、诱导时机(OD600)及诱导时间的优化表明,重组菌株Rosetta/p28a-CYP4的最佳诱导温度为37℃,最佳IPTG浓度为1.2 mmol/L,最佳诱导时机及诱导时间分别为0.59和6 h。

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