文献类型： 中文期刊

作者： 桑雷 ¹ ; 陈冬金 ¹ ; 孙世坤 ¹ ; 高承芳 ¹ ; 王锦祥 ¹ ; 陈岩锋 ¹ ; 谢喜平 ¹ ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： GnIH;闽西南黑兔;基因克隆;基因表达;生殖激素

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2023 年 001 期

页码： 201-212

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在获得兔促性腺激素抑制素（gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH）基因，检测其在不同组织和不同发育阶段下丘脑中的表达水平，研究其对幼龄公兔生殖激素分泌的影响。本研究以90日龄健康闽西南黑兔公兔为研究对象，采用RACE技术（rapid-amplification of cDNA ends）从下丘脑组织中克隆出GnIH基因，并对序列进行生物信息学分析；采用实时荧光定量PCR方法（real-time quantitative PCR,qPCR）检测GnIH基因mRNA在90日龄公兔不同组织表达水平（n=5）及11、30、60、90、120、150日龄公兔下丘脑中的表达水平（n=6）;连续10 d向80日龄公兔分别注射0、0.5、5和50μg鹌鹑GnIH相关肽（n=10）。第11天早上采集耳静脉血液后，屠宰公兔，采集睾丸组织，分别检测血清中生殖激素浓度（GnRH、FSH、LH、INHB和T）和睾丸组织中睾酮合成相关酶基因（StarR、3β-HSD和p450scc）mRNA的表达水平。结果表明，兔GnIH基因cDNA全长904 bp,包含5′UTR 41 bp, CDS区606 bp, 3′UTR 227 bp,编码201个氨基酸。该基因在90日龄公兔大部分组织中均有表达，其中在下丘脑中表达最高（P＜0.001）;在11到150日龄公兔下丘脑中，90日龄的表达量最低（P＜0.01）,90日龄后随着日龄增长其表达量极显著增加（P＜0.001）。注射GnIH后，50μg剂量组幼龄公兔的血清睾酮浓度极显著低于对照组和0.5μg剂量组（P＜0.001）,5μg剂量组睾酮浓度显著低于对照组和0.5μg剂量组（P＜0.05）,50μg剂量组的LH浓度显著高于对照组（P＜0.05）;此外，5μg组的p450scc mRNA表达量极显著高于其他处理组（P＜0.001）,而其他组睾酮合成相关酶基因表达量则差异不显著（P＞0.05）。结果提示，GnIH基因可能与LH和睾酮的分泌与合成有关，并参与公兔的生殖发育调控，长期注射高剂量GnIH相关肽会导致公兔对药物不敏感，其具体调控机制还需后续研究。