文献类型： 中文期刊
作者： 黄玲 1 ; 叶欢 1 ; 岳华梅 1 ; 侯彦岭 1 ; 屈紫玲 1 ; 阮瑞 1 ; 李创举 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院长江水产研究所
关键词： 草鱼;赤眼鳟;nanos2;组织分布;物种特异性引物
期刊名称： 中国水产科学
ISSN： 1005-8737
年卷期： 2024 年 31 卷 012 期
页码： 1411-1421
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 草鱼(Ctenopharyngodon idella)是我国重要的经济鱼类。为了加快草鱼育种进程,笔者建立了草鱼生殖干细胞移植方法,利用赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)借腹生殖产生草鱼配子。为建立移植后鉴定草鱼和赤眼鳟生殖细胞的方法,本研究克隆得到了草鱼和赤眼鳟生殖相关基因nanos2的全长cDNA序列,对其进行序列分析,通过荧光定量PCR (qPCR)研究其在不同组织的表达水平,最终设计特异性引物区分草鱼和赤眼鳟生殖细胞。克隆的草鱼和赤眼鱒nanos2 cDNA序列长度分别为649 bp和636 bp,分别编码145和144个氨基酸;比对发现草鱼和赤眼鳟Nanos2氨基酸序列同源性高达91.67%,与斑马鱼(Danio rerio)具有65.49%同源性;系统发育进化树显示草鱼和赤眼鳟的亲缘关系最近;荧光定量PCR分析表明,nanos2基因主要在草鱼和赤眼鳟性腺表达,且精巢的表达水平显著高于卵巢;通过比对草鱼和赤眼鳟nanos2基因序列,设计获得草鱼和赤眼鳟特异性与通用引物,PCR结果显示,草鱼nanos2特异性引物只在草鱼性腺扩增出179bp的目的条带,赤眼鳟nanos2特异性引物只在赤眼鳟性腺扩增出265 bp的目的条带, nanos2通用引物在草鱼和赤眼鳟性腺都能扩增出251 bp的目的条带,结果表明利用特异性引物可以高效区分草鱼和赤眼鳟生殖细胞。本研究为进一步探讨nanos2在草鱼和赤眼鳟性腺发育的作用机制奠定基础,也为后续监测草鱼生殖细胞在赤眼鳟性腺的嵌合及发育情况提供了一种有效方法。
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