文献类型： 中文期刊
作者： 陈松林 1 ; 陈细华 1 ; 邓文涛 1 ; 贺路 1 ; 杨峰 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院长江水产研究所,淡水鱼类种质资源与生物技术国家重点实验室!湖北沙市434000,中国水产科学研究院长江水产研究所,淡水鱼类种质资源与生物技术国家重点实验室!湖北沙市434000,中国水产科学研究院长江水产研究所,淡水鱼类种质资源与生物技术国家重点实验室!湖?
关键词： 草鱼;生活激素;单克隆抗体;非竞争式酶联免疫吸附测定法
期刊名称： 动物学报
ISSN： 0001-7302
年卷期： 1996 年 04 期
页码： 386-393
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 应用草鱼生长激素（ｇｃＧＨ）单克隆抗体及多价兔抗血清建立了草鱼ＧＨ非竞争式酶’联免疫吸附测定ＥＬＩＳＡ系统。用正辛酸法对腹水单抗进行了分离纯化，获得了高纯度的单抗制备物。聚丙烯酸胺凝胶电泳表明纯化的单抗由分子量分别为５５ｋＤ和２５ｋＤ的两条蛋白带组成。用纯化单抗铺底，用兔抗血清作后续抗体建立了一种测定草鱼ＧＨ的非竞争式双抗夹心ＥＬＩＳＡ方法。交叉试验表明该测定系统只与草鱼ＧＨ和基因重组鲤生长激素（ｒｃＧＨ）具有剂量依存的结合反应，而与大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）、牛生长激素（ｂＧＨ）、大马哈鱼促性腺激素（ｓＧｔＨ）、及黑鲢促性腺激素（ｂｓｃＧｔＨ）等均无交叉反应。该 ＥＬＩＳＡ方法的灵敏度可达０．８ｎｇ／ｍｌ，组内变异系数为 ５．９ ％，组间变异系数为７．６％，回收率达９０％以上。初步应用表明，鲤和团头鲂垂体抽提液、草鱼血清、鲤血清及鲫血清在该测定系统中有剂量依存的反应曲线，而大口鲶、黄颡鱼、中华鲟及黄鳝鱼垂体抽提液及大口鲶、胡子鲶和罗非鱼血清在该测定系统中没有交叉反应。
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