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橡胶树花序总蛋白双向电泳研究体系的建立与优化

文献类型： 中文期刊

作者： 王亚杰 1 ; 位明明 2 ; 李维国 3 ; 王祥军 4 ; 高新生 4 ;

作者机构： 1.海南大学农学院中国热带农业科学院橡胶研究所

2.中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室

3.中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心

4.中国热带农业科学院橡胶研究所

关键词： 橡胶树花序;蛋白组学;蛋白提取;双向电泳

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2016 年 08 期

页码： 2083-2089

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以橡胶树热研7-33-97花序为试验材料,分别采取3种蛋白质提取方法(TCA/丙酮法,酚抽提法和Tris-丙酮-酚法)提取橡胶树花序总蛋白。对3种蛋白质提取方法的蛋白提取率、单向SDS-PAGE电泳和双向电泳结果进行分析比较,结果表明3种方法中TCA/丙酮法的提取率最高(6.09±0.22)mg/g,单向SDS-PAGE电泳条带清晰且较完整,双向电泳后获得的蛋白点最多(994±25),是建立橡胶树花序蛋白质组学研究体系的较好方法。进一步对基于TCA/丙酮法提取的橡胶树花序总蛋白质双向电泳体系进行优化,结果显示利用p H范围为4~7的IPG胶条,在聚焦时间为7.0×10~4 Vh、蛋白上样量为1.0×10~3μg,以及12.5%凝胶浓度条件下,考马斯亮蓝染色法获得的橡胶树花序蛋白质双向电泳图谱质量最好,可为橡胶树生殖发育相关蛋白质组学研究奠定良好基础。

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