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玉米SSR分子标记技术操作规程的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 王伟 1 ; 杨文鹏 2 ; 关琦 1 ; 张文龙 3 ; 戴保威 1 ;

作者机构： 1.贵州大学农学院

2.贵州省农业生物技术重点实验室

3.贵州省种子总站

关键词： 玉米;SSR;技术规程;优化

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2008 年 36 卷 11 期

页码： 4459-4464+4493

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]建立玉米SSR标记技术操作规程,为其在生产中应用提供参考。[方法]以2个玉米杂交种(黔单16号、西山99)和4个玉米自交系(苏37、交51、黄C、4011)为试材,从玉米中提取基因组DNA,分别对不同DNA提取方法、SSR反应体系、PCR扩增程序和银染方法进行比较。[结果]采用SDS法、CTAB法提取DNA的扩增效果较好。玉米的最佳SSR反应体系为:1U Taq酶,1×Bufer,60ng模板DNA,2.0 mmol/LMg2+,0.15 mmol/LdNTPs,0.3μmol/L引物。最佳SSR扩增程序为:93℃,1 min;93℃,1 min;60℃,2 min;72℃,2 min,30个循环;72℃,5 min。用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶或6%变性聚丙烯酰胺凝胶来检测玉米SSR标记较好。[结论]采用优化的SSR标记检测体系,对贵州51份玉米杂交种进行遗传多样性分析,大多数引物扩出清晰条带。

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