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农杆菌介导高羊茅遗传转化体系的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 吴关庭 1 ; 胡张华 2 ; 郎春秀 2 ; 陈笑芸 2 ; 王伏林 2 ; 金卫 2 ; 陈锦清 2 ; 夏英武 1 ;

作者机构: 1.浙江大学原子核农业科学研究所

2.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

关键词: 高羊茅;农杆菌;遗传转化;影响因素;筛选效果

期刊名称: 核农学报

ISSN: 1000-8551

年卷期: 2005 年 19 卷 05 期

页码: 16-22

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导高羊茅(Festuca arundinaceaSchreb.)遗传转化体系,以草坪型高羊茅品种凌志的胚性愈伤组织为受体材料,通过gus基因瞬时表达检测,研究了多种因素对农杆菌介导转化的影响。结果表明,农杆菌介导高羊茅胚性愈伤组织转化的适宜条件为:愈伤组织在含BAP和NAA各0.5mg/L的培养基上预培养3d;菌液浓度OD600值0.7,感染时间15min;农杆菌预培养基和悬浮培养基以及共培养基中添加100μmol/L的乙酰丁香酮;共培养温度23℃,共培养时间3d,共培养基pH值5.2。不同浓度潮霉素筛选效果试验表明,采用低浓度(50mg/L)潮霉素连续筛选,再生获得的转基因植株数最多,因此是最为可取的筛选方式。

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