文献类型： 中文期刊

作者： 廖政 ¹ ; 嵇辛勤 ¹ ; 李基棕 ¹ ; 肖芳 ¹ ; 刘茂军 ¹ ; 毛立 ¹ ; 李文良 ¹ ; 孙敏 ¹ ;

作者机构： 1.贵州大学动物科学学院;江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

关键词： bta-miR-677;Ⅰ型干扰素;干扰素刺激基因;线粒体抗病毒信号蛋白

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2020 年 01 期

页码： 150-158

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在探究bta-miR-677调控Ⅰ型干扰素(IFN)表达的分子机制。将bta-miR-677转染MDBK细胞,检测Ⅰ型IFN和干扰素刺激基因(ISGs)的转录水平;随后通过TargetScan预测bta-miR-677的靶基因,双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR和Western blot验证bta-miR-677的靶基因;利用siRNA敲减验证靶基因对Ⅰ型IFN转录的影响。结果显示,过表达bta-miR-677组IFN-α/β的转录水平高于对照组2～4倍(P<0.001),随后检测到6种ISGs(IFI6、OAS1Y、OAS1Z、RSAD2、MX1和MX2)转录量上调2～16倍(P<0.01或P<0.001);反之,抑制表达bta-miR-677组IFN-α/β转录量下调(P<0.01或P<0.05),同时IFI6、OAS1Y、OAS1Z、RSAD2、MX1和MX2转录量下调(P<0.05或P<0.01)。经TargetScan预测和双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR和Western blot检测显示,bta-miR-677可靶向结合线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)的3′-UTR,抑制MAVS蛋白的表达;MAVS基因敲减后发现,IFN-α、IFN-β和6种ISGs转录量上调。研究结果表明,bta-miR-677通过靶向MAVS上调IFN-α/β转录水平,进而提高ISGs的表达量,为基于bta-miR-677研制抗病毒药物提供了重要资料。