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利用启动子捕获技术构建橡胶炭疽病菌突变体库

文献类型: 中文期刊

作者: 魏小慧 1 ; 林春花 2 ; 郑肖兰 2 ; 张新春 2 ; 贺春萍 2 ; 郑服丛 1 ;

作者机构: 1.海南大学环境与植物保护学院

2.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

关键词: 橡胶炭疽病菌;启动子捕获;农杆菌;遗传转化

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2009 年 30 卷 06 期

页码: 84-90

收录情况: CSCD

摘要: 通过不同限制性内切酶分别处理载体pCAMBIA1300、pCSN43和pBluescriptSK+后,构建启动子捕获载体pCAHPH,该载体经农杆菌介导转化橡胶炭疽病菌,建立起橡胶炭疽病菌T-DNA插入突变体库。经鉴定结果表明,突变体库的转化子数量为1105个,均抗潮霉素;随机测定248个转化子,有19个转化子致病力明显降低;随机挑取7个转化子做PCR检测,均可扩增出一条约800bp的目标条带,说明突变体为启动子捕获载体插入所引起;致病力显著减弱的转化子经southern检测,均为单拷贝插入。该结果旨在为开展橡胶炭疽病菌致病遗传分析和后续致病基因研究奠定基础。

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