文献类型： 中文期刊

作者： 徐雪可 ¹ ; 张乾义 ² ; 赵文娟 ³ ; 何高明 ¹ ; 吴桐忠 ³ ; 王莉莉 ³ ; 黎雪勤 ¹ ; 姜美奇 ¹ ; 韩猛立 ³ ; 张星星 ³ ; 张倩 ³ ; 钟发钢 ³ ; 黄新 ³ ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院

2.中国兽医药品监察所

3.新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室

关键词： 牛副流感病毒3型;牛呼吸道合胞体病毒;牛传染性鼻气管炎病毒;牛病毒性腹泻-黏膜病;TaqMan qPCR

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2025 年 47 卷 007 期

页码： 697-705

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一种能同时检测牛副流感病毒3型（BPIV3）、牛呼吸道合胞体病毒（BRSV）、牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）和牛病毒性腹泻病毒（BVDV）这4种病原的方法，本研究分别以BPIV3和BRSV的P基因、IBRV的gI基因和BVDV的5'UTR基因为靶基因设计特异性引物和探针，构建质粒标准品pUC57-BPIV3-P、pUC57-BRSV-P、pUC57-IBRV-gI和PVC57-BVDV-5'UTR，并经PCR和测序鉴定正确后等体积比混合作为模板，采用方阵法对引物、探针和各反应条件等的优化，初步建立引起牛呼吸道疾病综合征（BRDC）4种病毒性病原的多重TaqMan qPCR检测方法。结果显示，建立的多重qPCR仅能特异性检测BPIV3、BRSV、IBRV和BVDV，与引起BRDC其他病原的牛冠状病毒（BCoV）、牛支原体（M-bov）、牛多杀性巴氏杆菌（Pm）、牛溶血性曼氏杆菌（Mh）均无交叉反应；对1:1:1:1混合的4种质粒标准品的检测限均为10拷贝/μL；组内和组间重复性试验的变异系数均小于1%；以本研究方法和国家标准检测法对149份临床样品平行检测BVDV，结果显示两种方法的总符合率分别为80.85%，以本研究方法和已有专利中的多重qPCR方法对149份临床样品平行检测BPIV3、BRSV、IBRV，结果显示两种方法的总符合率分别为75.07%、100%和92.83%，临床样品中存在4种病原8种混合感染情况。结果表明，本研究建立的致BRDC的4种病毒多重Taq Man qPCR方法特异性强、敏感性高、重复性和准确性均较好，可用于BPIV3、BRSV、IBRV和BVDV这4种常见牛病毒的鉴别检测和流行病学调查，为养殖场BRDC的防控奠定基础。