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獭兔RAPB反应体系优化研究

文献类型： 中文期刊

作者： 任克良 1 ; 李燕平; 贺东昌; 吴信生; 翟平; 梁全忠; 张李俊; 周胜花;

作者机构： 1.山西省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 獭兔;RAPD;优化

期刊名称： 山西农业科学

ISSN： 1002-2481

年卷期： 2007 年 035 卷 006 期

页码： 103-105

收录情况： CSCD

摘要： 对獭兔RAPD体系中Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、基因组DNA浓度进行研究.结果表明:Taq酶浓度为1.0U,引物浓度为10pmol/μl,基因组DNA浓度为50ng/μl时,可获得清晰、稳定性好的条带.优化的RAPD反应体系为:总体积为20.0μl.10×Buffer(含Mg^2+)为2.0μl;dNTPs(各2.5mmol/L)为2.0μl;Taq酶浓度为1.0U,引物浓度为10pmol/μl,基因组DNA浓度为50ng/μl;超纯水为13.8μl.PCR扩增条件为:97℃预变性7min,94℃ 1 min,36℃退火1min,72℃ 2 min,45个循环后,在72℃延伸10min结束,4℃保存.PCR扩增产物通过1.4％的琼脂糖凝胶电泳检测.点样后,以2-3V/cm电压降稳压电泳3.0.3.5h.

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[1]獭兔RAPD反应体系优化研究. 任克良,李燕平,贺东昌,吴信生,翟平,梁全忠,张李俊,周胜花. 2007

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