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RT-PCR检测甜菜坏死黄脉病毒及总RNA提取方法研究

文献类型: 中文期刊

作者: 牛素清 1 ; 白晨 1 ; 张惠忠 1 ; 李晓东 1 ; 付增娟 1 ; 赵尚敏 1 ; 斯琴巴特尔 2 ; 轩继雨 1 ; 李树生 1 ;

作者机构: 1.内蒙古农牧业科学院甜菜研究所

2.内蒙古农牧业科学院生物中心

关键词: 甜菜;甜菜坏死黄脉病毒;RT-PCR

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2008 年 23 卷 01 期

页码: 207-210

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为选择较为适合甜菜总RNA的提取方法,构建和优化RT有效体系。以田间甜菜叶片、根毛及根表皮为材料,研究了提取甜菜总RNA的方法以及利用RT-PCR技术进行甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)的检测。研究表明,获得良好的RT-PCR扩增效果,RT体系中dNTPs浓度、引物、AMV、模板RNA的浓度要分别达到1 mmol/L,1μmol/L,0.1 U/μL,0.01μg/μL较好。PCR体系中dNTPs浓度、引物、TaqDNA聚合酶、Mg2+的浓度要分别达到0.1 mmol/L,0.1μmol/L,0.01U/μL,1.48 mmol/L效果较好。RT-PCR法对BNYVV检测,可作为甜菜品种(育种材料)早期抗丛根病性鉴定的依据之一。

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