文献类型： 中文期刊
作者： 张莉 1 ; 姜媛媛 1 ; 张健 1 ; 杨贞耐 1 ;
作者机构： 1.中国农业科技东北创新中心农产品加工研究中心
关键词： 牛凝乳酶;分泌表达;毕赤酵母
期刊名称： 生物工程学报
ISSN： 1000-3061
年卷期： 2009 年 25 卷 08 期
页码： 1160-1165
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 通过PCR技术从克隆载体pMD18T-Prochy上扩增牛凝乳酶原基因,双酶切后定向插入到酵母表达载体pPICZaA中,构建表达质粒pPICZaA-Prochy,线性化后电转化毕赤酵母GS115,经PCR和测序鉴定凝乳酶原基因成功插入到毕赤酵母的基因组中。在甲醇诱导下进行凝乳酶的表达,SDS-PAGE分析证明重组凝乳酶的分子量约为37 kD,培养基上清液中凝乳酶的活性为12.2 SU/mL。本研究首次应用毕赤酵母表达牛凝乳酶,在培养基中获得分泌表达的重组凝乳酶,为干酪工业提供了新型及优良的凝乳酶来源。
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