文献类型: 中文期刊
作者: 卢清侠 1 ; 刘畅 1 ; 郭官鹏 2 ; 邢广旭 1 ; 刘运超 1 ; 邓瑞广 1 ; 张改平 1 ;
作者机构: 1.河南省农业科学院
2.河南农业大学牧医工程学院
关键词: A型口蹄疫病毒;VP1蛋白;间接ELISA
期刊名称: 西北农业学报
ISSN: 1004-1389
年卷期: 2014 年 23 卷 01 期
页码: 30-35
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 以原核表达经纯化复性制备的A型口蹄疫病毒(FMDV)VP1蛋白代替传统病毒抗原包被,建立快速、安全、有效的A型FMDV抗体ELISA检测方法。对前期制备的A型VP1蛋白进行Western-Blot检测,结果表明,VP1蛋白能够特异性识别A型FMDV阳性牛血清,可作为检测抗原建立检测A型FMDV抗体的方法。以最佳质量浓度1mg/L VP1蛋白为检测抗原,方阵滴定法确定最佳检测血清稀释度为1∶50[V(血清)∶V(封闭液)],最佳的酶标二抗稀释度为1∶2 000[V(酶标二抗)∶V(封闭液)],建立A型FMDV抗体ELISA检测方法。该方法的敏感性为94.32%,特异性为99.09%,批内与批间重复试验变异系数均小于8%。采用该方法检测201份临床血清,与液相阻断ELISA试剂盒的符合率达92.54%。研制的VP1-ELISA试剂盒特异、敏感、稳定、操作简便,可用来监控A型口蹄疫抗体水平。
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