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油菜乙酰羟基酸合酶基因BnAHAS1的克隆及其重组蛋白质的原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 胡茂龙 1 ; 孔令娜 2 ; 龙卫华 1 ; 高建芹 1 ; 浦惠明 1 ; 戚存扣 1 ; 张洁夫 1 ; 陈松 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院经济作物研究所/农业部长江下游棉花与油菜重点实验室/国家油料作物改良中心南京分中心

2.南京农业大学植物生产国家级实验教学中心

关键词: 乙酰羟基酸合酶;除草剂;油菜;基因克隆;原核表达

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2014 年 05 期

页码: 72-77

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用RT-PCR技术从甘蓝型油菜宁油16号(Brassica napus L.)中克隆到乙酰羟基酸合酶基因BnAHAS1的cDNA序列,该序列含有1个1 968 bp的开放阅读框,编码蛋白质655个氨基酸,分子量约为7.1×104,预测等电点为6.16。将该基因克隆到原核表达载体pCold II中,经酶切和测序鉴定后,将正确的重组质粒pCold IIBnAHAS1导入大肠杆菌BL21(DE3)。在15℃下以终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导12 h后,获得预期大小的重组蛋白质His-BnAHAS1,并用Western blot确定此重组蛋白质为目的蛋白质。

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