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副猪嗜血杆菌四环素耐药基因TetB的PCR检测方法建立

文献类型： 中文期刊

作者： 江军 1 ; 李军星 1 ; 康磊 1 ; 袁秀芳 1 ; 徐丽华 1 ; 王一成 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 副猪嗜血杆菌;耐药基因TetB;PCR检测

期刊名称： 浙江农业科学

ISSN： 0528-9017

年卷期： 2014 年 1 卷 12 期

页码： 1924-1927

摘要： 在本实验室前期研究的基础上,选取与四环素耐药表型相关性较好的Tet B基因,建立PCR方法,以探索副猪嗜血杆菌耐药性的快速检测方法。本研究利用四环素主要耐药基因Tet B的引物,对PCR反应条件进行优化,以副猪嗜血杆菌基因组DNA为模板,未出现非特异性扩增条带,PCR扩增条带单一。将Tet B基因克隆至p MD 19T载体,以重组质粒为标准品,确定了最低检测拷贝数,经测定,最低检测拷贝数为1.54×103。以不同稀释度的21A7菌株基因组DNA为模板,确定了最低细菌检出量,经测定,最低检测细菌数量为4.6×103个。该方法为建立临床快速检测副猪嗜血杆菌耐药性奠定了基础。

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