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洋葱黄矮病毒同种单抗夹心ELISA检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 王斌 1 ; 刘建青 2 ; 战笑蕾 2 ; 李方方 3 ; 李小宇 2 ; 梁雨欣 2 ; 王晨 2 ; 张金花 2 ; 张春雨 2 ; 王永志 2 ;

作者机构: 1.吉林农业大学植物保护学院

2.吉林省农业科学院(中国农业科技东北创新中心)植物保护研究所

3.中国农业科学院植物保护研究所

关键词: 分蘖洋葱;洋葱黄矮病毒;单克隆抗体;ELISA

期刊名称: 植物病理学报

ISSN: 0412-0914

年卷期: 2025 年 55 卷 003 期

页码: 511-516

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 洋葱黄矮病毒(onion yellow dwarf virus, OYDV)是影响葱属作物产量和质量的主要病毒之一。OYDV高效检测方法的建立对葱属作物OYDV病害防控具有重要意义。本研究小组利用制备的8株OYDV单克隆抗体,通过筛选最佳配对抗体,建立了基于单抗3D3的检测OYDV的单抗夹心ELISA(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)方法,并对反应条件进行优化。该方法对OYDV感染的分蘖洋葱叶片的检测灵敏度为2 560倍稀释,对纯化的重组OYDV衣壳蛋白的最低检测限为11.71 ng·mL-1,检测感染葱属作物的葱潜隐病毒和胡葱黄条病毒呈阴性反应,且与RT-PCR方法的一致率为96%。本研究建立的检测OYDV的双抗夹心ELISA方法的样品和检测抗体同时孵育,简化了检测步骤,在1 h内即可完成检测;检测OYDV的双抗夹心ELISA方法的建立为该病毒的检测、脱毒种球生产、抗性种质资源鉴定等提供技术支持。

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