文献类型： 中文期刊
作者： 张凤军 1 ; 张永成 2 ;
作者机构： 1.青海省农林科学院
2.青海省马铃薯育种重点实验室
关键词： 马铃薯;正交设计;SSR-PCR;体系优化
期刊名称： 种子
ISSN： 1001-4705
年卷期： 2011 年 30 卷 01 期
页码： 8-10
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 应用L16(45)正交设计对影响马铃薯SSR-PCR的主要参数进行优化,建立适于马铃薯SSR-PCR反应的最佳体系。结果表明:各因素不同水平浓度对PCR反应结果均有显著影响。马铃薯SSR-PCR优化反应体系为:10×PCR Buffer 1.0μl、模板DNA约30 ng、dNTP 200 mol/L、SSR引物66 ng、Taq DNA聚合酶0.25 U、Mg2+2.25 mmol/L,加ddH2O至终体积10.0μl。PCR扩增程序如下:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,53℃复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸10 min,然后4℃保存。
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