文献类型： 中文期刊

作者： 杨洁[1 ; 黄文睿 ¹ ; 李泰明 ² ; 吴洁 ² ; 曹荣月 ² ;

作者机构： 1.中国药科大学生命科学与技术学院微基因药物实验室

2.中国药科大学生命科学与技术学院

关键词： 霍乱毒素B亚单位;胰岛素B链(9-23)肽段;包含体;五聚体;神经节苷脂GM1

期刊名称： 药物生物技术

ISSN： 1005-8915

年卷期： 2012 年 19 卷 02 期

页码： 113-116

收录情况： CSCD

摘要： 为了在大肠杆菌中表达霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin B subunit,CTB)与胰岛素B链(9-23)肽段结构类似多肽(Ins B(9-23))的融合蛋白,使用基因工程方法构建了CTB与Ins B(9-23)的融合基因CTB-Ins B-X若干,并将融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌株经乳糖诱导后,其表达产物经过12%SDS-PAGE分析表明该菌株可以包含体形式表达融合蛋白,并制备得到纯度较高的重组蛋白。该重组蛋白的包含体经过变性、复性后,可以在体外自组装成五聚体结构。GM1-ELISA分析结果表明,重组蛋白在体外可以与神经节苷脂GM1(monosialoganglioside)特异性结合,表明该融合蛋白保持了CTB形成五聚体的生物活性。