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牛源多杀性巴氏杆菌与支原体双重PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 冯明祥 1 ; 姜玲玲 2 ; 周景瑞 2 ; 冉江 2 ; 余波 2 ; 李蓉蓉 3 ;

作者机构： 1.贵州省关岭自治县畜牧服务中心

2.贵州省农业科学院畜牧兽医研究所

3.贵州省师范学院

关键词： 多杀性巴氏杆菌;牛支原体;双重PCR;检测

期刊名称： 上海畜牧兽医通讯

ISSN： 1000-7725

年卷期： 2024 年 002 期

页码： 17-23

摘要： 为建立一种快速、准确、简便的多杀性巴氏杆菌与牛支原体双重PCR检测方法，参照GenBank中多杀性巴氏杆菌kmt 1基因序列和牛支原体oppD/F基因序列设计2对引物，以2种病原的单重PCR的扩增体系和条件为基础，对双重PCR的退火温度、引物用量、模板用量进行优化，分析所建立的双重PCR方法的特异性、敏感性和重复性，并将其应用于屠宰场273份疑似多杀性巴氏杆菌、牛支原体感染牛的肺脏组织样品验证。结果表明：所建立的双重PCR检测方法对多杀性巴氏杆菌和牛支原体具有特异性；双重PCR体系混合质粒的最低检测质量浓度为1.25×10-6 ng/μL，敏感性高；间隔2周的2次检测结果一致，重复性好；273份屠宰场样品的双重PCR检测结果与单重PCR检测结果符合率为100%。

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