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洋葱黄矮病毒和韭葱黄条病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备

文献类型： 中文期刊

作者： 鲁宇文 1 ; 沈嘉乐 1 ; 韦传宝 2 ; 郑红英 3 ; 陈炯 3 ; 陈剑平 3 ;

作者机构： 1.浙江大学生命科学学院

2.皖西学院化学与生命科学系

3.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

关键词： 洋葱黄矮病毒;韭葱黄条病毒;原核表达;抗血清制备;间接ELISA

期刊名称： 科技通报

ISSN： 1001-7119

年卷期： 2006 年 22 卷 05 期

页码： 62-65

收录情况： CSCD

摘要： 根据已报道的洋葱黄矮病毒(OYDV)和韭葱黄条病毒(LYSV)序列设计特异引物,分别扩增OYDV和LYSV的全长外壳蛋白(CP)基因,插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中诱导表达。通过12%SDS-PAGE和5%～20%梯度SDS-PAGE二次制备电泳纯化诱导产物,免疫小鼠,获得高纯度的抗CP血清。Westernblot分析表明,OYDV与LYSV血清学远缘相关。对大蒜田间样品的间接ELISA检测表明,OYDV和LYSV在田间普遍发生,且通常为复合侵染。两者间微弱的血清学交叉反应对ELISA检测结果影响极小,可用于样品检测。

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