文献类型： 中文期刊

作者： 林优红 ¹ ; 程霞英 ¹ ; 杨东风 ¹ ; 姜永厚 ¹ ; 邢少辰 ¹ ; 韦正乙 ¹ ; 韩蕊莲 ¹ ; 梁宗锁 ¹ ; 杨宗岐 ¹ ;

作者机构： 1.浙江理工大学生命科学与医药学院浙江省植物次生代谢调控重点实验室;吉林省农业科学院农业生物技术研究所

关键词： 猪圆环病毒2型(PCV2);可读框2(ORF2)基因;衣壳(Cap)蛋白;烟草叶绿体;基因枪转化

期刊名称： 中国生物化学与分子生物学报

ISSN： 1007-7626

年卷期： 2020 年 03 期

页码： 350-356

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)可读框2(open reading frame 2,ORF2)基因编码具有多个抗原表位的病毒衣壳(Cap)蛋白,能在机体内有效引发免疫反应并产生中和抗体,是预防和治疗猪圆环病毒病(porcine circovirus-associated disease, PCVAD)的主要抗原。但Cap蛋白高昂的生产成本限制了它的广泛应用。为了探索Cap蛋白新的生产途径,本研究选择烟草叶绿体为表达平台,构建了ORF2抗原基因烟草叶绿体表达载体pNK-a03,并通过基因枪法(gene biolistics)将表达载体导入烟草叶绿体中。转化植株经PCR和RT-PCR检测,证实ORF2抗原基因已整合进烟草叶绿体基因组中且正常转录。蛋白质印迹检测和ELISA分析表明,Cap蛋白在烟草叶绿体内获得有效表达,具有免疫活性。此外,种子萌发研究结果显示,转基因烟草植株F1代具有aadA抗性,目的基因可正常进行遗传。这些研究结果为探索Cap蛋白的新型表达途径提供了理论基础。