文献类型： 中文期刊
作者： 刘淑杰 1 ; 李永明 2 ; 徐子伟 1 ; 王一成 2 ;
作者机构： 1.江南大学
2.浙江省农业科学院
关键词： 产肠毒素大肠杆菌;Fae G;乳酸乳球菌;表达
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2009 年 31 卷 09 期
页码： 688-692
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为探索研制预防仔猪腹泻口服基因工程疫苗,本研究根据GenBank中登录的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)Fae G基因序列设计一对引物,以ETEC C83907菌株为模板,通过PCR方法扩增出K88菌毛粘附素主要蛋白亚基Fae G的基因,将其定向克隆到乳酸乳球菌(L.lactis)分泌表达载体pNZ8112中,构建了分泌表达载体pNZ8112-fae G,并转化到L.lactis NZ9000中。重组菌株经5ng/mL nisin诱导3h后,仅在L.lactis菌体内检测到Fae G的表达,上清液中未检测到Fae G蛋白。SDS-PAGE电泳检测结果显示,表达的目的蛋白分子量大小约为27ku,表达产物的量达到了菌体总蛋白的13.56%。Western blot分析结果表明,表达蛋白具有免疫反应性。本实验为进一步研究FaeG在L.lactis中分泌表达的影响因素奠定了基础。
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