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尼罗罗非鱼1号染色体分离及文库构建方法研究

文献类型: 中文期刊

作者: 耿青 1 ; 肖炜 1 ; 李大宇 1 ; 邹芝英 1 ; 祝璟琳 1 ; 杨弘 1 ;

作者机构: 1.南京农业大学无锡渔业学院;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

关键词: 尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus);1号染色体;显微分离;微克隆

期刊名称: 淡水渔业

ISSN: 1000-6907

年卷期: 2018 年 04 期

页码: 3-8

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)为对象,采用体内注射植物血细胞凝集素(PHA)方式收集有丝分裂后期的鱼体头肾细胞,低渗法制片,运用激光显微分离获得尼罗罗非鱼1号染色体,分离后的单染色体通过特异性酶切和LA-PCR体外扩增,得到500~2 000 bp之间的DNA片段,并通过Southern blot和微卫星标记得到验证。扩增片段通过电泳回收、连接转化、感受态细胞培养等步骤构建尼罗罗非鱼1号染色体微克隆文库,克隆片段长度在300~600 bp之间。

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