文献类型： 中文期刊

作者： 于兰芳 ¹ ; 周硕 ² ; 张双喜 ² ; 纪玉洁 ² ; 刘永伟 ³ ;

作者机构： 1.河北省威县林业局;河北省农林科学院遗传生理研究所/河北省植物转基因中心;宁夏农林科学院农作物研究所;南京农业大学动物医学院

2.;河北省威县林业局;河北省农林科学院遗传生理研究所/河北省植物转基因中心;宁夏农林科学院农作物研究所;南京农业大学动物医学院

3.;河北省威县林业局;河北省农林科学院遗传生理研究所/河北省植物转基因中心;宁夏农林科学院农作物研究所;南京农业大学动物医学院;

关键词： 葡萄;F-box蛋白;干旱;表达模式;亚细胞定位

期刊名称： 植物遗传资源学报

ISSN： 1672-1810

年卷期： 2018 年 02 期

页码： 361-369

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： F-box蛋白广泛存在于真核生物中,主要参与细胞周期调控、凋亡及多种激素信号转导等过程;近几年发现,F-box蛋白还介导了植物对逆境胁迫的应答响应,对维持植物正常生长发育至关重要。干旱等非生物逆境胁迫严重影响了葡萄正常生长发育和果实品质,克隆并分析干旱响应基因对改良葡萄的抗性有重要意义。本研究根据葡萄干旱转录组分析结果,发现11个F-box基因在干旱胁迫下表达量明显上调;其中,Vv F-box5基因位于葡萄第19条染色体上,对干旱胁迫的响应明显高于其他F-box成员;Vv F-box5基因含有5个外显子和4个内含子,内含子均含有保守的GT…AG序列;Vv F-box5基因包含1824 bp的开放阅读框,编码607个氨基酸,氨基酸序列的N端含有1个保守的F-box结构域,C端包含1个FBD和2个LRR结构域。启动子元件分析表明,Vv F-box5基因含有多种逆境应答元件,包括GA响应元件GARE-motif、Me JA响应元件CGTCAmotif、干旱胁迫相关元件ERE、HSE和LTR、光应答顺式作用元件ACE、Box4和Sp1以及与细胞周期调节和发育相关的元件等。实时荧光定量PCR结果显示,在干旱、高盐、ABA和Me JA处理下,Vv F-box5基因的表达量明显升高;亚细胞定位结果显示,Vv F-box5蛋白主要定位于洋葱表皮细胞的细胞核中;Vv F-box5的过表达明显提高了转基因拟南芥在干旱处理下的成活率。另外,本研究利用原核表达系统诱导6×His-Vv F-box5融合蛋白的表达,并使用蛋白标记亲和层析柱纯化获得了6×HisVv F-box5融合蛋白,为下一步深入研究Vv F-box5的功能奠定基础。