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利用正交设计优化一品红SRAP反应体系

文献类型: 中文期刊

作者: 姜维华 1 ; 陶俊 1 ; 冯立国 1 ; 苏家乐 1 ;

作者机构: 1.扬州大学园艺与植物保护学院;江苏省农业科学院园艺研究所

关键词: 一品红;SRAP;正交设计;优化

期刊名称: 苏州科技学院学报(自然科学版)

ISSN: 1672-0687

年卷期: 2009 年 01 期

页码: 48-52

摘要: 运用L16(45)正交设计对影响一品红SRAP反应的5个因素(DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶)在4个水平上进行优化试验,PCR结果采用DPSV3.01软件分析。结果表明,各因素对SRAP反应的影响依次为:Mg2+>引物>dNTPs>DNA模板>Taq酶;一品红SRAP反应最佳体系为:50μL的PCR体系中含有Mg2+2.5mmol·L-1、引物500pmol·L-1、dNTPs0.20mmol·L-1、DNA模板100ng、Taq酶1.0U;应用最佳反应体系对PCR程序中的退火温度进行优化,得出SRAP-PCR反应适宜的第一步退火温度为36℃,第二步退火温度为50℃。

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