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花鲈胚胎干细胞移植及嵌合体的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 沙珍霞 1 ; 刘洋 2 ; 陈松林 2 ; 叶寒清 2 ; 田永胜 2 ; 孟亮 2 ; 唐启升 2 ;

作者机构: 1.中国海洋大学海洋生命学院

2.农业部海洋渔业可持续发展重点实验室

关键词: 花鲈胚胎干细胞(LJES1);绿色荧光蛋白(GFP);细胞移植;显微注射;嵌合体

期刊名称: 高技术通讯

ISSN: 1002-0470

年卷期: 2006 年 16 卷 002 期

页码: 186-190

收录情况: EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要: 旨在通过花鲈胚胎干细胞(LJES1)移植构建嵌合体,证实LJES1细胞的体内分化能力和发育全能性.采用脂质体介导法将线性化PCMV-EGFP质粒导入到长期培养的LJES1细胞内,细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达率为5%~10%,以此为供体,通过显微注射方法把20~50个LJES1细胞移植到花鲈囊胚中,共移植囊胚478枚,获得了20枚表达GFP的嵌合体胚胎,其中的15枚胚胎发育成鱼苗.荧光显微观察和PCR检测显示了LJES1细胞可在宿主胚胎内片状嵌合和单细胞分散嵌合,嵌合部位可分布于胚体的三个胚层;同时也证明GFP是一种优良的遗传标记.本实验结果为证实LJES1细胞的发育全能性提供了有力证据.

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