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用抑制消减杂交法分离巴西橡胶树胶乳特异表达基因

文献类型: 中文期刊

作者: 邓柳红 1 ; 罗明武 2 ; 曾会才 1 ; 杨卫帆 1 ; 张春发 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院热带生物技术国家重点实验室

2.华南热带农业大学

关键词: 巴西橡胶树;抑制消减杂交法;胶乳;反式NorthernDot-Blot

期刊名称: 林业科学

ISSN: 1001-7488

年卷期: 2006 年 42 卷 06 期

页码: 32-36

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用巴西橡胶树常割树胶乳的Poly(A+)RNA为Tester,叶片Poly(A+)RNA为Driver,通过抑制消减杂交法(suppressivesubtractivehybridization,SSH)构建了一个胶乳特异表达基因差减文库,通过菌落PCR及反式NorthernDot-Blot筛选鉴定阳性差异片段,获得79个胶乳特异表达阳性克隆,部分阳性克隆还通过NorthernBlot杂交及RT-PCR进一步验证。随机挑选部分阳性克隆序列比较分析,结果表明有部分克隆与巴西橡胶树中已知的基因相同,而多数克隆在巴西橡胶树中是新发现,它们与橡胶生物合成、物质代谢运输、信号传导和形态建成等相关。

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