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海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证

文献类型： 中文期刊

作者： 黄超 1 ; 张丽丽 2 ; 邓柳红 3 ; 张春发 2 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

3.海南省蛋白质工程药物重点实验室/海口市生命科学药物工程技术研究开发中心

关键词： 美洲商陆;抗病毒蛋白;载体构建;原核表达;海南五指山

期刊名称： 热带生物学报

ISSN： 1674-7054

年卷期： 2016 年 7 卷 01 期

页码： 82-88

摘要： 提取春季海南五指山美洲商陆叶片总RNA,利用RT-PCR技术获得c DNA,再根据Genbank上公布的PAP-Ⅰ基因序列设计引物扩增PAP-Ⅰ基因,并连接到p~(ET)-30a载体上进行表达,表达的产物以不溶的包涵体形式存在,经过变性、镍柱亲和层析纯化,纯化后的重组蛋白经过Western Blot验证表明该基因得到了正确表达,利用柱上循环复性后的重组PAP-Ⅰ蛋白经麦胚提取物转录/翻译偶联系统验证具有抑制蛋白质合成的活性。

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