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鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的初步表达

文献类型： 中文期刊

作者： 付峰 1 ; 刘荭 2 ; 范万红 2 ; 江育林 2 ; 黄倢 1 ;

作者机构： 1.农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

2.深圳出入境检验检疫局动植食中心水生动物病重点实验室

关键词： 鲤春病毒血症病毒;糖蛋白;克隆;毕赤酵母;分泌表达

期刊名称： 海洋水产研究

ISSN： 1000-7075

年卷期： 2007 年 28 卷 04 期

页码： 74-78

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据SVCV糖蛋白基因序列设计引物,在5’引物和3’引物中分别引入酶切位点。以病毒核酸为模板用RT-PCR方法扩增该段糖蛋白基因,将所得的基因片段(517和521)克隆至穿梭载体pGAPZαA/B之GAP启动子下游位点,构建含α信号肽的重组表达载体。获得的重组质粒pGAPZαA-517和pGAPZαB-521经线性化后,电击法转化毕赤酵母SMD1168菌株,构建分泌型表达SVCV糖蛋白的重组酵母菌株。酵母菌落PCR法检测表明,已成功构建分泌表达SVCV糖蛋白的酵母基因工程菌株,斑点印迹法进一步分析表明有目的蛋白的成功表达。

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