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蚕豆VfNHX1基因克隆及初步功能验证

文献类型: 中文期刊

作者: 金文海 1 ; 樊有存 1 ; 李萍 2 ; 范惠玲 3 ; 侯万伟 2 ; 滕长才 2 ; 刘玉皎 1 ; 武学霞 1 ;

作者机构: 1.青海大学省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室

2.青海省农林科学院

3.河西学院农业与生物技术学院

关键词: 蚕豆;Na+/H+逆向转运蛋白;基因克隆;盐胁迫;功能验证

期刊名称: 福建农业学报

ISSN: 1008-0384

年卷期: 2024 年 39 卷 006 期

页码: 689-699

收录情况: CSCD

摘要: 【目的】探究蚕豆(Vicia faba L.)VfNHX1基因在响应盐胁迫过程中的作用。【方法】通过3′和5′RACE方法,从蚕豆中克隆了1个Na+/H+逆向转运蛋白编码基因VfNHX1,并对其进行了生物信息学分析、亚细胞定位、盐胁迫下的表达分析和初步功能验证。【结果】(1)该基因全长2 255 bp,CDS编码区长1 629 bp,编码542个氨基酸;(2)生物信息学分析显示,该蛋白有10个跨膜区,不具有信号肽,是一个结构稳定的膜蛋白,且包含1个NHX蛋白家族特有的Na-H Exchanger结构域;亚细胞定位分析显示VfNHX1定位在液泡膜上;(3)实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析显示,在NaCl处理后,叶片中VfNHX1表达量呈现先降低后升高,随即又下降的变化趋势,且在12 h时达最高值;根中VfNHX1表达量先降低后升高,在48 h时表达量显著升高(P<0.01);(4)酵母生长试验结果表明,VfNHX1可以提高盐敏感酵母突变体AXT4K对高盐的耐受能力。【结论】VfNHX1基因能够响应盐胁迫,是蚕豆潜在抗盐功能基因。

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