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可溶性泛素样特异性蛋白酶1的表达及活性鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 冯丽丽 1 ; 陈海燕; 刘毓侠; 郭彦; 周国利; 任银玲;

作者机构： 1.河南省农业科学院农业经济与信息研究所

关键词： 泛素样特异性蛋白酶1(ULP1);SUMO蛋白酶;表达;纯化;生物学活性

期刊名称： 生物技术通讯

ISSN： 1009-0002

年卷期： 2017 年 05 期

页码： 629-633

摘要： 目的:高效可溶性表达泛素样特异性蛋白酶1(ULP1)。方法:根据大肠杆菌密码子的偏好性优化合成编码ULP1的基因片段序列,将其克隆到原核表达载体p GEX-6P-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用0.5 mmol/L IPTG于37℃诱导表达8 h,观察重组蛋白ULP1的表达情况;优化诱导时间及IPTG浓度,并鉴定重组蛋白ULP1的生物学活性。结果:重组蛋白ULP1表达的最佳条件为37℃、0.1 mmol/L的IPTG诱导表达5 h,目的蛋白以可溶性表达为主;Western印迹结果表明,重组蛋白ULP1能够被His单克隆抗体识别,重组蛋白ULP1能够特异性酶切SUMO-GFP。结论:表达了具有生物学活性的SUMO蛋白酶ULP1。

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