文献类型： 中文期刊

作者： 于江玮 ¹ ; 程慧敏 ² ; 林健 ² ; 杨宝琳 ² ; 黄程 ² ; 杨志远 ² ; 胡格 ¹ ;

作者机构： 1.北京农学院动物科学技术学院

2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所

关键词： 鸭瘟病毒;US6基因;TaqMan探针;荧光定量PCR;增殖规律;人工感染

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2025 年 56 卷 002 期

页码： 765-773

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一种鸭瘟病毒（duck plague virus, DPV）TaqMan荧光定量PCR快速检测方法，基于DPV US6基因保守序列设计特异性引物和探针，构建重组质粒DPV-US6标准品，对方法敏感性、特异性和重复性进行评价，并应用于DPV在鸡胚成纤维细胞（CEF）上增殖及人工感染鸭器官组织上分布规律研究。结果显示，成功建立了DPV TaqMan荧光定量PCR检测方法，该方法最低检测限可以达到10 copies·μL^-1,与番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鸭坦布苏病毒、鸭呼肠孤病毒、H9N2亚型禽流感病毒、鸭甲型肝炎病毒（I型和III型）和鸭衣原体均无交叉反应，批间和批内变异系数均小于2.0%。DPV-AX株感染CEF细胞后，病毒核酸拷贝数检测结果表明，4～8 h病毒增殖缓慢，12～60 h迅速上升，60 h达到最高峰，72～144 h逐渐下降，与TCID₅₀法测定的病毒滴度相比，两种检测方法具有良好相关性，可实现拷贝数替代TCID₅₀。DPV人工感染鸭组织脏器的病毒载量分布检测表明，肝脏中的病毒载量最高。本试验建立的检测方法为研究DPV-AX株在CEF上的增殖规律提供工具。