文献类型： 中文期刊

作者： 任春晓 ¹ ; 冯华 ² ; 张腾 ¹ ; 蒋敏 ¹ ; 刘运超 ² ; 金前跃 ² ; 张改平 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

2.河南省农业科学院

关键词： 猪圆环病毒2型;Cap蛋白;病毒样颗粒;免疫原性;亚单位疫苗

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2021 年 007 期

页码： 154-160

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究一种高效的预防猪圆环病毒2b亚型（PCV2b）感染的亚单位疫苗,针对其主要免疫原Cap蛋白的基因进行分析,将Cap蛋白上重要中和表位²²⁶LKDPPLNP²³³以重复串联的方式连接于cap基因C端（capE2）,并构建于pFastBac^TMI载体上,借助昆虫杆状病毒表达系统进行表达,利用SDS-PAGE、Western blot分析和动态光散射及透射电镜观察等对重组蛋白CapE2进行鉴定。将纯化的CapE2蛋白免疫小鼠,同时以未连接中和表位的Cap蛋白、PCV2亚单位疫苗和PBS为对照,收集免疫血清分析目的重组蛋白的免疫原性以及连接中和表位对Cap蛋白免疫原性的影响。结果表明,Cap及CapE2蛋白成功在sf21细胞内表达;纯化后的目的蛋白能够有效地与PCV2单克隆抗体产生特异性反应,并且可以在体外自组装形成均一的、直径约17 nm的病毒样颗粒;血清抗体检测结果显示,在第2次免疫后,CapE2免疫组抗体水平迅速提高,并在3免之后显著高于其他免疫组;中和抗体测定结果表明,Cap及CapE2组血清抗体效价均显著高于疫苗免疫对照组,且CapE2免疫组血清的中和效价可达1:2⁹。通过昆虫杆状病毒表达系统表达的连接2个中和表位的Cap蛋白,能自组装形成病毒样颗粒,并且具有较好的免疫原性,为PCV2感染的预防提供了新的疫苗候选。