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木薯干旱胁迫响应CC类谷氧还蛋白基因的筛选与体外表达分析

文献类型： 中文期刊

作者： 王雪; 阮孟斌; 王斌; 郭鑫; 于晓玲;

关键词： 木薯;干旱胁迫响应;CC类GRX基因;体外表达;Western blot

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2017 年 04 期

页码： 1204-1211

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： CC类谷氧还蛋白(CC-type glutaredoxins)是高等植物中所特有的一类谷氧还蛋白,模式植物中的研究表明,CC类GRX可以与TGA转录因子互作,在植物器官发育及响应环境胁迫过程中起重要的调控作用。基因差异表达分析结果表明,木薯中有多个CC类GRX基因在叶片中的表达受干旱胁迫的诱导。为了进一步研究木薯中CC类GRX蛋白与TGA的互作,本研究选择了其中的Me GRX058和Me GRX785这两个基因作进一步体外蛋白表达分析。理化性质及二级结构预测分析表明Me GRX058和Me GRX785蛋白分子量均在11 k D左右,具有谷氧还蛋白以及CC类谷氧还蛋白典型的结构域。通过构建酵母表达载体及植物表达载体,利用HA-Tag和GFP分别对Me GRX058和Me GRX785蛋白进行标记,在酵母和转基因木薯中进行表达,随后对融合蛋白的表达进行了Western blot检测。结果表明Me GRX058和Me GRX785成功在酵母和转基因木薯中表达,为进一步筛选它们的互作蛋白、研究其结构与功能做铺垫。

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