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鸡新城疫病毒Lasota株HN蛋白主要抗原表位基因在大肠杆菌中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 赵坤 1 ; 王选年 1 ; 赵德明 1 ;

作者机构： 1.中国农业大学动物医学院

关键词： 新城疫病毒;HN蛋白;主要抗原表位基因;克隆;原核表达

期刊名称： 河南农业大学学报

ISSN： 1000-2340

年卷期： 2008 年 42 卷 04 期

页码： 402-405+413

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用RT-PCR法从NDV Lasota疫苗株中扩增出HN基因,将其克隆到pGEM-T easy vector中,构建了重组质粒pT-HN.设计了1对引物,用PCR法扩增出HN蛋白主要抗原表位基因(442~1 734 bp共1 239 bp),将其连接到原核表达载体pET-28a(+),构建重组质粒pET-HN.用IPTG诱导使其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.SDS-PAGE结果表明,NDV HN主要抗原表位基因在pET-HN中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子量为28 kD.同时,通过试验摸索并确定了表达HN蛋白主要抗原表位基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.4 mmol.L-1,诱导时间为4 h,温度为37℃.

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