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大黄鱼β_2-微球蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的重组表达

文献类型： 中文期刊

作者： 余素红 1 ; 王玉桥 2 ; 陈新华 3 ;

作者机构： 1.厦门大学生命科学学院

2.国家海洋局第三海洋研究所

3.福建省农业科学院

关键词： 大黄鱼;β2-微球蛋白;克隆;重组表达;Western-blotting

期刊名称： 台湾海峡

ISSN： 1000-8160

年卷期： 2009 年 28 卷 01 期

页码： 13-18

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)是一类高度多态的基因群,它广泛分布于各种脊椎动物体内,在启动特异性免疫应答中起关键作用.MHC根据结构分为I型和II型两种.β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2m)是MHCI型分子的轻链.本文根据大黄鱼β2m的表达序列标签(expressed sequence tags,EST)序列设计合成了特异性引物,利用RT-PCR技术从大黄鱼脾脏组织中克隆了β2m基因(Pscr-β2m);构建了含β2m基因的原核表达载体(pGEX4T-2-β2m),在0.1mmol/dm3IPTG诱导下重组β2m得到了表达;采用Sepharose 4B亲合层析纯化目的蛋白并制备了抗体;Western-blotting分析证实了该抗体具有与天然大黄鱼脾脏组织中β2m蛋白反应的特性.这些结果为进一步研究鱼类β2m结构与功能的关系,以及制备MHCI类分子四聚体奠定基础.

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