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鸭α-干扰素的真核与原核表达及生物活性的比较

文献类型： 中文期刊

作者： 邹欢 1 ; 刘宇 2 ; 黄元 2 ; 王晓虎 2 ; 陈晶 2 ; 张健騑 2 ; 向华 2 ;

作者机构： 1.华南农业大学兽医学院

2.华南农业大学兽医学院;广东省农业科学院兽医研究所

关键词： 鸭;α-干扰素;真核;原核;蛋白表达;生物活性

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2014 年 01 期

页码： 118-120

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究鸭α-干扰素在真核和原核中表达的不同,试验构建真核重组质粒Duifnα-pPICZα在巴斯德毕赤酵母X33株中实现高效分泌表达,构建原核重组质粒pET24α-Duifnα在大肠杆菌DH5α中表达蛋白,His·Tag包涵体蛋白纯化得到高纯度蛋白液,并进行了SDS-PAGE检测。结果表明:鸭α-干扰素分子质量为21 ku,通过鸭胚测得真核重组质粒表达的鸭α-干扰素能抑制水泡性口炎病毒(VSV)对鸭胚细胞的攻击,最高效价达1×105U/mL;通过IPTG诱导实现高蛋白表达,表达的量比真核质粒表达的多,纯化后的原核重组质粒表达的鸭α-干扰素也能抑制VSV对鸭胚细胞的攻击,最高效价达1×106U/mL。说明原核表达蛋白的活性比真核高10个单位。

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