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采用酵母双杂交系统筛选梨PbTMT4互作因子

文献类型： 中文期刊

作者： 程寅胜 1 ; 杨立 1 ; 陈健秋 1 ; 张绍铃 1 ; 伍涛 1 ; 张虎平 1 ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院果树茶叶研究所;南京农业大学园艺学院

关键词： PbTMT4;酵母双杂交系统;cDNA文库;互作因子

期刊名称： 湖北农业科学

ISSN： 0439-8114

年卷期： 2019 年 24 期

页码： 240-245

摘要： 为筛选梨糖转运相关蛋白PbTMT4互作因子,基于已经建立好的砀山酥梨果实发育时期的cDNA文库,利用Matchmaker~(TM) Gold酵母双杂交系统,以构建的重组质粒pDHB1-PbTMT4为诱饵质粒,采用PEG/LiAc法转化酵母菌株NMY51。利用表型筛选法检测PbTMT4的自激活作用和毒害作用,利用氨基酸缺陷型培养基筛选PbTMT4互作因子。结果表明,诱饵蛋白PbTMT4在酵母双杂交系统中无毒性和自激活作用。通过酵母双杂交筛选以及测序和序列比对分析,共获得13个与PbTMT4蛋白相互作用的宿主蛋白。

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