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基于TaqMan探针的A型塞尼卡病毒荧光定量RT-PCR方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

作者: 郭振华 1 ; 阮海宇 1 ; 乔松林 1 ; 邓瑞广 1 ; 张改平 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院

关键词: 塞尼卡病毒;荧光定量RT-PCR;猪水泡病;诊断

期刊名称: 动物医学进展

ISSN: 1007-5038

年卷期: 2020 年 005 期

页码: 6-12

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立一种快速、特异、灵敏的A型塞尼卡病毒(SVA)检测方法,通过比对我国不同地区SVA流行毒株的VP1基因序列,在其保守区域设计了1组引物和探针,通过条件优化,建立了基于TaqMan探针的荧光定量RT-PCR检测方法.用该方法检测口蹄疫病毒、猪瘟病毒、日本脑炎病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒等均不发生交叉反应.敏感性分析显示,该方法的最低检出量为278拷贝/μL,比常规RT-PCR的灵敏度高100倍.重复性分析显示,所建立方法的批内变异系数为0.3%~1.0%,批间变异系数为0.8%~2.0%,具有良好的稳定性.进一步对16份疑似SVA感染的临床病料检进行了检测,结果显示8份为SVA核酸阳性.提示建立的检测方法可以用于临床SVA感染的鉴别诊断,为我国SVA的诊断和控制提供了良好的技术支撑.

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