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猪繁殖与呼吸综合征病毒RdRp基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 蔡汝健 1 ; 宋长绪 1 ; 郝永清 2 ; 杨鼎 2 ; 何锦玲 3 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院兽医研究所

2.内蒙古农业大学动物科技学院

3.西北农林科技大学动物医学院

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;RdRp基因;克隆;原核表达

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2009 年 30 卷 02 期

页码： 16-18

收录情况： 北大核心

摘要： 将猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA依赖性的RNA聚合酶(RdRp)基因进行克隆、表达,并获得纯化重组蛋白,为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒RdRp的功能奠定基础。以RdRp基因cDNA为模板,用PCR扩增出RdRp基因片段,应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pET32a(+)重组,阳性克隆重组质粒经酶切及测序鉴定,IPTG诱导高效表达。PCR法扩增出720 bp的片段,酶切及测序鉴定获得正确的重组质粒,在大肠埃希菌LB21中表达得到分子质量约为46 ku的融合蛋白。成功克隆及表达了猪繁殖与呼吸综合征病毒RdRp基因。

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