文献类型： 中文期刊

作者： 李茹 ¹ ; 周洁 ² ; 李冬月 ² ; 王栩鸣 ² ; 杨勇 ² ; 余初浪 ² ; 程晔 ² ; 严成其 ² ; 陈剑平 ¹ ;

作者机构： 1.南京农业大学

2.浙江省植物有害生物防控重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部植物保护生物技术重点实验室/浙江省植物病毒学重点实验室/浙江省农业科学院

关键词： OsWRKY7基因;启动子;表达特性;亚细胞定位;转录活性

期刊名称： 中国水稻科学

ISSN： 1001-7216

年卷期： 2015 年 29 卷 06 期

页码： 559-570

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： WRKY蛋白是植物中一类重要的转录因子,不仅参与植物生长发育的调控,还参与植物对各种生物和非生物胁迫的响应。本研究从水稻日本晴中分离OsWRKY7基因的编码序列(CDS),并克隆其启动子序列进行表达研究。首先通过实时定量PCR的方法检测不同组织中OsWRKY7基因的相对表达量,结果表明,OsWRKY7在叶片中的表达水平较高,且开花期的剑叶中表达量高于7d苗龄的幼叶。进一步将OsWRKY7启动子与GUS报告基因融合,构建了植物表达载体pOsWRKY7-GUS,并将此载体转化日本晴。转基因植株不同组织染色分析结果显示,该启动子在植株的主根尖、叶片、颖壳中有GUS活性,其中叶片上可见全叶范围分布的大量蓝色斑点,这些染色结果与实时定量PCR的结果一致。进一步的接菌和激素处理还显示,OsWRKY7启动子在根和叶中的表达均受水稻白叶枯病菌[Xanthomonas oryzae pv.Oryzae(Xoo)]P10生理小种侵染的诱导,同时还受外源施加的细胞分裂素和生长素诱导,而水杨酸则会抑制其在根和叶中的表达。此外,我们还将OsWRKY7基因的CDS序列分别与绿色荧光蛋白和酵母GAL4的DNA结合域融合,对该基因进行水稻茎原生质体亚细胞定位分析和酵母自激活检验,结果显示该基因定位于细胞核中并具有转录自激活活性。上述结果表明OsWRKY7具有明显的转录激活因子特征,其很可能参与了水稻对白叶枯菌的防御反应以及对多种激素信号的转导过程。