文献类型： 中文期刊

作者： 于建宁 ¹ ; 潘伟芹 ² ; 王公金 ¹ ; 徐小波 ¹ ; 李燕 ² ; 于峰祥 ² ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院畜牧研究所

2.南京师范大学医学分子生物学重点实验室

关键词： SQR基因;pLEB590;乳酸菌;重组载体

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2014 年 30 卷 01 期

页码： 156-161

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究硫化物-醌氧化还原酶(SQR)基因的乳酸菌表达载体pLEB590-SQR的构建及其在乳酸乳球菌MG1363中的表达,通过限制性内切酶酶切载体pLEB590与目的片段SQR,回收纯化并用T4连接酶进行连接,连接产物通过电转化法转化到乳酸菌中,提取所得到的乳酸乳球菌质粒pLEB590-SQR进行双酶切鉴定与普通PCR鉴定;并通过电转化将重组质粒导入乳酸乳球菌MG1363中,在含有Nisin(乳酸链球菌素)的选择培养基中筛选阳性克隆,采用SDS-PAGE电泳和Western杂交检测SQR蛋白质的表达情况。最后检测重组质粒在MG1363中的遗传稳定性。结果显示,SQR乳酸菌重组表达载体pLEB590-SQR构建成功,从MG1363中成功检测到目的蛋白质SQR的表达,携带pLEB590-SQR的MG1363遗传稳定性达90%以上。乳酸乳球菌MG1363可以用来表达硫化物-醌氧化还原酶(SQR)。